Paris polyphylla，又名爱苹果，是一种多年生草本植物，主要​​分布在东南亚。这种药用植物是蔷薇科的一员，在中药中得到了广泛的应用。根据研究，P. polyphylla具有抗菌、抗肿瘤和抗癌特性。为了确定其作为抗癌剂的潜力，特别是对抗骨肉瘤(骨骼中最常见的癌症)的潜力， 中国南京大学的研究人员 测试了多叶杨提取物对抗不同骨肉瘤细胞系的效果。他们还研究了其活动背后的机制。他们的研究结果发表在 《美国中医杂志》上.

P. polyphylla 提取物抗骨癌

在传统中医中，多叶杨 被称为解热剂(退烧)和解毒剂。但几千年来，它也被广泛应用于癌症治疗。为了评估其抗骨肉瘤作用，中国研究人员使用乙醇作为溶剂获得了多叶杨梅提取物。然后，他们 使用 MTT 测定法测试了聚叶杨乙醇提取物 (PPEE) 对 143B、MG-63、U-2 OS 和 hFOB1.19 细胞的抗增殖活性。

143B 细胞是市售的人骨肉瘤细胞，胸苷激酶呈阴性。胸苷激酶是一种在 DNA 合成的补救途径中发挥作用的酶，其水平指示增殖。MG-63和U-2 OS也是人骨肉瘤细胞系;MG-63 细胞具有成纤维细胞样形态，而 U2-Os 细胞系是最早产生的细胞系之一，具有 上皮细胞样形态。另一方面，hFOB1.19 细胞是人类成骨细胞或骨细胞。

为了确认 PPEE 的促凋亡和细胞周期作用，研究人员使用了 Hoechst 33342 染色和流式细胞术。Hoechst 33342 染色使用荧光染料对 DNA 和细胞核进行染色。它在确定细胞死亡或凋亡方面特别有用。他们还使用 Transwell 和 3d 培养分析以及伤口愈合来研究 PPEE 的抗迁移、抗侵入和抗血管生成模拟效应。Transwell 检测是一种迁移检测，用于研究上皮细胞的迁移反应。

最后，他们使用小鼠异种移植物(组织移植物)模型来确定 PPEE 在体内的抗骨肉瘤功效，并使用血液学特征和肝肾功能评估其毒性。

P. polyphylla 抑制骨癌细胞的增殖和肿瘤形成

研究人员报告说，PPEE 能够抑制 143B、MG-63 和 U2-OS 细胞的增殖。有趣的是，它对正常成骨细胞几乎没有细胞毒性，这表明它具有良好的选择性抗增殖活性，使正常细胞不受影响。

PPEE 还通过 caspase 激活、增加 Bax/Bcl-2 比率和 PARP 裂解促进 143B 细胞的凋亡。半胱天冬酶是参与程序性细胞死亡和半胱天冬酶活化的酶，特别是使 PARP 蛋白失活的 caspase-3。PARP 裂解是半胱天冬酶介导的细胞死亡的标志，而 Bax/Bcl-2 比率的上调也与细胞凋亡有关。

在细胞周期效应方面，PPEE 诱导 G2/M 期阻滞与 CDK1、Cdc25C、Chk2 磷酸化升高以及 cyclin B1、CDK1、Cdc25C 表达下调相关。G2 期是细胞修复和有丝分裂准备(M 期)的地方。根据研究，阻滞 G2/M 期会增强细胞凋亡。

PPEE 还在非细胞毒性浓度下通过降低 FAK、Mig-7、MMP2 和 MMP9 的表达来抑制 143B 细胞迁移、侵袭和血管生成模拟 (VM)。VM 是一种独立于肿瘤内皮细胞的血液供应系统。VM的存在与肿瘤分级高、生存期短、侵袭和转移有关。

在体内，每天口服 PPEE 4 周在低毒性的 143B 异种移植模型中也显示出有效的抗肿瘤和抗 VM 活性。

基于这些结果，研究人员得出结论，PPEE 在体外和体内都具有抗 VM 和 抗骨肉瘤活性 ，使其成为骨肉瘤治疗的潜在候选者。